کلن کردن ژنRGL2 از DNA ژنومی آرابیدوپسیس (Arabidopsis thaliana)

نوع مقاله : مقاله علمی - پژوهشی

نویسنده

عضو هیئت علمی مؤسسه تحقیقات جنگلها و مراتع کشور

چکیده

یکی از ژنهایی که در سنتز جیبرلین در گیاه شناخته شده و موقعیت آنها در ژنوم آرابیدپسیس مشخص شده است،
RGL2 می‌باشد که در این بررسی کلن گردید. با استخراج DNA از آرابیدوپسیس، اکوتیپ کلمبیا و استفاده از آغازگرهای اختصاصی که بر اساس توالی ژن مورد نظر ساخته شده بودند، این ژن تکثیر شد. پلاسمید  PET-32a (+)و ژن تکثیر شده با استفاده از دو آنزیم برشی خاص به نامهای Nco I و Sal I برش داده شدند. پس از اتصال ژن مورد نظر به پلاسمید ناقل، پلاسمید حاوی ژن به باکتری E. coli سوش XL10-Gold منتقل گردید. با اجرای PCR بر روی نتایج حاصل از انتقال پلاسمید ناقل، کلن شدن این ژن مورد تأیید قرار گرفت.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


Berardini, T.Z., Bollman, K., Sun, H., and Poethig, R.S., 2001. Regulation of vegetative phase change in Arabidopsis thaliana by cyclophilin 40. Science, 291: 2405–2407.
Bewley, J.D., 1997. Seed germination and dormancy. Plant Cell, 9: 1055-1066.
Davies, P.J., 1995. Plant Hormones: Physiology, Biochemistry, and Molecular Biology. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, the Netherlands.
Dill, A., Jung, H.S., and Sun, T.P., 2001. The DELLA motif is essential for gibberellin-induced degradation of RGA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 98: 14162–14167.
Fleet, C.M. and Sun, T.P., 2005. A DELLAcate balance: the role of gibberellin in plant morphogenesis. Curr. Opin. Plant Biol., 8: 77–85.
Gan, Y., Kumimoto, R., Liu, C., Ratcliffe, O., Yu H. and Broun, P., 2006. Glabrous inflorescence stems modulates the regulation by gibberellins of epidermal differentiation and shoot maturation in Arabidopsis. The Plant Cell, 18: 1383-1395.
Groot, E.P. and Meicenheimer, R.D., 2000. Comparison of leaf plastochron index and allometric analyses of tooth development in Arabidopsis thaliana. J. Plant Growth Regul., 19: 77–89.
Hunter, C., Sun, H. and Poethig, R.S., 2003. The Arabidopsis heterochronic gene ZIPPY is an ARGONAUTE family member. Curr. Biol., 13: 1734–1739.
Lee, S., Cheng, H., King, K. E., Wang, W., He, Y., Hussain, A., Lo, J., Harberd, N. P. and Peng, J., 2002. Gibberellin regulates Arabidopsis seed germination via RGL2, a GAI/RGA-like gene whose expression is up-regulated following imbibitions Genes and Development, 16: 646-658,
McGinnis, K.M., Thomas, S.G., Soule, J.D., Strader, L.C., Zale, J.M., Sun, T.P. and Steber, C.M., 2003. The Arabidopsis SLEEPY1 gene encodes a putative F-box subunit of an SCF E3 ubiquitin ligase. Plant Cell, 15: 1120–1130
Meyerowitz, E.M. and Somerville, C.R., 1994. Arabidopsis. Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY.
Murray, M.G. and Thompson, M.F., 1980. Rapid isolation of high molecular weight plant DNA. Nucl. Acid Res. 8: 4321-4325.
Nakajima, K., Sena, G., Nawy, T. and Benfey, P.N., 2001. Intercellular movement of the putative transcription factor SHR in root patterning. Nature, 413: 307-311.
Peng, J.R., Carol, P., Richards, D.E., King, K.E., Cowling, R.J., Murphy, G.P. and Harberd, N.P., 1997. The Arabidopsis GAI gene defines a signaling pathway that negatively regulates gibberellin responses. Genes and Development. 11: 3194-3205.
Peng, J.R., Richards, D.E., Hartley, N.M., Murphy, G.P., Devos, K.M., Flintham, J.E., Beales, J., Fish, L.J., Worland, A.J. and Pelica, F., 1999. "Green Revolution" genes encode mutant gibberellin response modulators. Nature 400: 256-261.
Silverstone, A.L., Ciampaglio, C.N. and Sun, T.P., 1998. The Arabidopsis RGA gene encodes a transcriptional regulator repressing the gibberellin signal transduction pathway. Plant Cell 10: 155-169.
Steber, C.M, Cooney, S.E., and McCourt, P., 1998. Isolation of the GA-response mutant sly1 as a suppressor of ABI1-1 in Arabidopsis thaliana. Genetics 149: 509-521.