بهینه‌سازی و القای ژنتیکی ریشه‌های موئین گیاه دارویی کلوس (Kelussia odoratissima Mozaff)

نوع مقاله : مقاله علمی - پژوهشی

نویسندگان

1 دانش‌آموخته کارشناسی ارشد، بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشگاه لرستان، خرم‌آباد

2 استاد، دانشکده کشاورزی، گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشگاه لرستان، خرم‌آباد

3 دانش‌آموخته دکتری، اصلاح نباتات، دانشکده کشاورزی، گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشگاه لرستان، خرم‌آباد

10.22092/ijrfpbgr.2022.356510.1395

چکیده

 کلوس (Kelussia odoratissima Mozaff) یکی از گیاهان دارویی، ادویه­ ای و معطر انحصاری ایران است که در نقاط محدودی در کشور می­روید. با توجه به اهمیت ترکیبات داروئی آن در طب سنتی، برداشت بی­رویه، کلوس را در معرض انقراض قرار داده است. از این­رو، برای جلوگیری از انقراض کلوس، می­توان از کشت ­بافت گیاهی در جهت تولید ترکیبات مفید و متابولیت­ های ثانویه استفاده نمود. کشت ریشه موئین یک سیستم کارآمد برای تولید ترکیبات داروئی و متابولیت ثانویه ارزشمند در گیاهان است. به همین منظور، برای بررسی اثر فاکتورهای مختلف بر روی القاء و تولید ریشه موئین در گیاه کلوس، از دو سویه بیماری­زای Agrobacterium rhizogenes (A4 و ATCC15834)، دو ریزنمونه (لپه و زیرلپه)، سه سطح استوسرینگون و سه سطح گلوگز به صورت آزمایش فاکتوریل بر پایه طرح کاملا تصادفی با سه تکرار استفاده شد. نتایج نشان داد که هر دو سویه اگروباکتریوم توانستند سبب القاء ریشه موئین در گیاه کلوس شوند. همچنین سویه اگروباکتریوم ATCC15834 در محیط کشت MS پایه با µM 100 استوسرینگون در حضور 0/5% گلوکز بالاترین کارایی را در تولید ریشه­ های موئین در ریزنمونه­های لپه داشت و کمترین میزان تولید ریشه موئین در سویه اگروباکتریوم A4 در محیط کشت MS پایه بدون استوسرینگون و گلوکز در هر دو ریزنمونه مشاهده شد. صحت القاء ریشه ­ها توسط A. rizhogenes به کمک PCR و آغازگرهای اختصاصی ژن rolC نیز تایید شد. نتایج این تحقیق برای اولین بار نشان داد که القاء ریشه موئین در ریزنمونه­های کلوس امکان پذیر است .

کلیدواژه‌ها

موضوعات


  • Ahmadi, F., Kadivar, M. and Shahedi, M. 2007. Antioxidant activity of Kelussia odoratissima Mozaff. in model and food systems. Food chemistry, 105(1): 57-64.
  • Akramian, M., Tabatabaei, S.M.F. and Mirmasoumi, M. 2008. Virulence of different strains of Agrobacterium rhizogenes on genetic transformation of four Hyoscyamus species.American-Eurasian journal of Agricultural & Environmental Sciences, 3(5): 759-763.
  • Brijwal, L. and Tamta, S. 2015. Agrobacterium rhizogenes mediated hairy root induction in endangered Berberis aristata DC. SpringerPlus, 4(1): 1-10.
  • Dewick, P.M. 2002. Medicinal natural products: a biosynthetic approach, John Wiley & Sons,507 pages.
  • Dini torkamani, M.R., Abaspour, N., Jafari, M. And Samadi, A. 2014. Induction and optimization of hairy root growth condition for Valeriana officinalis, through inoculation by Agrobacterium rhizogenes, Journal of cell and tissue, 5(1):23-30.
  • Ebrahimi, M., Mokhtari, A. and Amirian, R 2018. A highly efficient method for somatic embryogenesis of Kelussia odorotissima an endangered medicinal plant. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 132(1): 99-110.
  • Gawel, N. and Jarret, R. 1991. A modified CTAB DNA extraction procedure for Musa and Ipomoea. Plant Molecular Biology Reporter, 9(3):262-266.
  • Godwin, I., Todd, G., Ford-Lloyd, B. and Newbury, H.J. 1991. The effects of acetosyringone and pH on Agrobacterium-mediated transformation vary according to plant species. Plant Cell Reports, 9(12): 671-675.
  • Gelvin, Stanton B. Agrobacterium and plant genes involved in T-DNA transfer and integration. Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology, June 2000, vol. 51, p. 223-256.
  • Haj hashemi, V.A., Ghanadi, A. and Soltani, L. 2003. Analgesic and antiinfammatory effects of amirkabiria adrotissima. Journal of Reserch in Medical Sciences (JRMS), 7(2):121-125.
  • Hasanloo, T., Rezazadeh, S. and Rahnama, H. 2009. Hairy roots as a source for production of valuable pharmaceutical materials. Journal of Medicinal Plants, 8(29): 1-190.
  • Jafari Hajati, R., Payamnoor, V., Ghasemi Bezdi, K. and Ahmadian Chashmi, N 2016. Production of pharmaceutical active ingredients via hairy root induction of Birch (Betula pendula). Iranian Journal of Rangelands and Forests Plant Breeding and Genetic Research, 24(2): 165-176 ).In persian).
  • Jalilian, A. 2017.Induction of Transgenic Hairy Roots in Medicinal Plant Poppy (Papaver Somniferum) by Agrobacterium Rhizogenes-Mediated Transformation. Journal of Plant Productions (Agronomy, Breeding and Horticulture), 39(4): 1-14. (In persian).
  • Khademi, M., Nazarian-Firouzabadi, F. and Ismaili, A. 2019. The effect of phosphorus and nitrogen on hairy roots production in Nicotiana tobaccum as a model plant. Journal of Plant Productions (Agronomy, Breeding and Horticulture), 44(1):13-24.
  • Kim, Y., Wyslouzil, B.E. and Weathers, P.J. 2002. Secondary metabolism of hairy root cultures in bioreactors. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant, 38(1): 1-10.
  • Kumar, V., Sharma, A., Narasimha Prasad, B.C., Bhaskar Gururaj, H. and Aswathanarayana Ravishankar, G. 2006. Agrobacterium rhizogenes mediated genetic transformation resulting in hairy root formation is enhanced by ultrasonication and acetosyringone treatment. Electronic Journal of Biotechnology, 9(4): 349-357.
  • Levee, V., Garin, E., Klimaszewska, K. and Seguin, A. 1999. Stable genetic transformation of white pine (Pinus strobus L.) after cocultivation of embryogenic tissues with Agrobacterium tumefaciens. Molecular Breeding, 5(5): 429-440.
  • Li, W., Asada, Y. and Yoshikawa, T. 2000. Flavonoid constituents from Glycyrrhiza glabra hairy root cultures. Phytochemistry, 55(5): 447-456
  • Maroufi, A. and Majdi, M. 2015. Assessment of hairy roots induction of the medicinal plant Alecost (Tanacetum balsamita) using Agrobacterium rhizogenes. Genetic Engineering and Biosafety Journal, 4(2): 103-111.
  • Montazeri, F., Omidi, M., Khialparast, F. and Sabokdast, M. 2015. Hairy root induction by Agrobacterium rhizogenes in galbanum (Ferula gummosa). Iranian Journal of Rangelands and Forests Plant Breeding and Genetic Research. 22(2):251-260. (In persian).
  • Nader, B.L., Taketa, A.T.C., Pereda-Miranda, R. and Villarreal, M.L. 2006. Production of triterpenoids in liquid-cultivated hairy roots of Galphimia glauca. Planta Medica. 72(9): 842-844.
  • Oksman-Caldentey, K.-M. and Hiltunen, R. 1996. Transgenic crops for improved pharmaceutical products. Field crops research, 45(1): 57-69.
  • Omidbaigi, R., Sefidkon, F. and Saeedi, K. 2008. Essential oil content and composition of Kelussia odoratissima as an Iranian endemic plant. Journal of Essential Oil Bearing Plants. 11(6): 594-597.
  • Petrova, M., Zayova, E., Dincheva, I., Badjakov, I. and Vlahova, M. (2015). Influence of carbon sources on growth and GC-MS based metabolite profiling of Arnica montana L. hairy roots. Turkish Journal of Biology, 39(3): 469-478.
  • Rao, S.R. and Ravishankar, G. 2002. Plant cell cultures: chemical factories of secondary metabolites. Biotechnology advances. 20(2): 101-153.
  • Rolland, F., Baena-Gonzalez, E. and Sheen, J. 2006. Sugar sensing and signaling in plants: conserved and novel mechanisms. Annual Review of Plant Biology, 57(1): 675-709.
  • Salimi, M., Ebrahimi, A.E., Shojaei Asadieh, Z. And Saei Dehkordi, S. 2010. Essential oil composition of kelussia adrotissima Iranian Journal of Medicinal and Aromatics Plants. 26(2):147-156. (Inpersian).
  • Shen, W.-H., Escudero, J., Schläppi, M., Ramos, C., Hohn, B. and Koukolíková-Nicola, Z. 1993. T-DNA transfer to maize cells: histochemical investigation of beta-glucuronidase activity in maize tissues. Proceedings of the National Academy of Sciences, 90(4): 1488-1492.

Sivakumar, G., Yu, K., Hahn, E. and Paek, K. 2005. Optimization of organic nutrients for ginseng hairy roots production in large-scale bioreactors. Current Science, 89(4): 641-649.